WEBVTT Kind: captions Language: fr 00:00:00.620 --> 00:00:01.620 Merci Lauren. 00:00:01.620 --> 00:00:05.560 Bien, aujourd'hui je vais vous parler du travail que j'ai effectué au cours des dernières 00:00:05.560 --> 00:00:09.680 années depuis le début de la pandémie. 00:00:09.680 --> 00:00:17.090 Je me suis penché sur les interactions nouvelles que le virus entretient avec des récepteurs 00:00:17.090 --> 00:00:23.990 que nous avons identifiés dans le corps, puis sur la manière dont nous pouvons cibler 00:00:23.990 --> 00:00:28.519 thérapeutiquement cela et l'impact que cela a sur le cerveau. 00:00:28.519 --> 00:00:30.429 Notre travail est vraiment axé sur la protéine spiculaire. 00:00:30.429 --> 00:00:35.420 Je ne suis pas sûr que vous puissiez voir mon pointeur lorsque je le déplace ? D'accord, 00:00:35.420 --> 00:00:36.420 excellent. 00:00:36.420 --> 00:00:41.870 Donc, notre travail se concentre vraiment sur la protéine spiculaire que le virus utilise 00:00:41.870 --> 00:00:46.850 pour se lier aux récepteurs de la surface cellulaire et, finalement, envahir les cellules. 00:00:46.850 --> 00:00:53.239 Nous avons identifié assez tôt, pendant la pandémie, nous et d'autres, que la séquence 00:00:53.239 --> 00:00:59.359 d'acides aminés de la protéine Spike contenait une structure particulière de trois acides 00:00:59.359 --> 00:01:00.789 aminés appelée RGD. 00:01:00.789 --> 00:01:06.980 Il s'agit d'un motif de liaison particulier dans les structures protéiques qui reconnaît 00:01:06.980 --> 00:01:11.740 une classe particulière de récepteurs de surface cellulaire appelés intégrines. 00:01:11.740 --> 00:01:15.540 Ce qui était particulièrement intéressant à ce sujet est double : premièrement, que 00:01:15.540 --> 00:01:19.460 le SARS-CoV-2 était relativement unique parmi les autres coronavirus que vous voyez énumérés 00:01:19.460 --> 00:01:25.270 à l'écran en ce sens qu'il avait ce motif de liaison, et d'autres ne l'avaient pas. 00:01:25.270 --> 00:01:30.360 Il a été spéculé assez tôt dans la pandémie, début 2020, que la présence de ce domaine 00:01:30.360 --> 00:01:35.659 de liaison à l'intégrine sur les protéines Spike du coronavirus pourrait conférer une 00:01:35.659 --> 00:01:40.630 partie de la virulence que le virus a déclenchée sur nous tous. 00:01:40.630 --> 00:01:49.090 Cela dit, nous et d'autres avons examiné ce qui se passait avec cette protéine Spike 00:01:49.090 --> 00:01:55.950 particulière à mesure que les différentes variantes émergeaient au cours des dernières 00:01:55.950 --> 00:01:56.950 années. 00:01:56.950 --> 00:02:08.100 Bien sûr, avec chaque mutation dans la protéine Spike et les mutations de ce motif de liaison 00:02:08.100 --> 00:02:13.050 à l'intégrine, ce RGD, qui était déjà assez largement exprimé à la pointe de la 00:02:13.050 --> 00:02:17.760 lance, pour ainsi dire, devenait encore plus proéminent avec diverses mutations. 00:02:17.760 --> 00:02:21.960 Ici, vous regardez la variante britannique, mais d'autres variantes ultérieures l'ont 00:02:21.960 --> 00:02:22.960 confirmé. 00:02:22.960 --> 00:02:28.400 Il existe un domaine de liaison spécifique du récepteur à la pointe de la protéine 00:02:28.400 --> 00:02:35.300 Spike du coronavirus qui confère une capacité unique à se lier à cette classe de récepteurs 00:02:35.300 --> 00:02:36.350 appelés intégrines. 00:02:36.350 --> 00:02:42.010 D'accord, donc les intégrines, très simplement, sont composées de deux sous-unités : une 00:02:42.010 --> 00:02:43.920 alpha et une bêta. 00:02:43.920 --> 00:02:48.690 Elles se lient à quelque chose appelé la matrice extracellulaire. 00:02:48.690 --> 00:02:55.050 La matrice extracellulaire est essentiellement la colle qui aide à maintenir les cellules 00:02:55.050 --> 00:02:56.050 ensemble. 00:02:56.050 --> 00:02:59.070 Elle forme des membranes de base. 00:02:59.070 --> 00:03:04.010 Chaque cellule du corps exprime des intégrines de différents types. 00:03:04.010 --> 00:03:10.470 Ces sous-unités sont appelées alpha et bêta, selon laquelle l'alpha se lie à laquelle 00:03:10.470 --> 00:03:16.160 la bêta, ou s'associe à quelle bêta, et vous obtenez des récepteurs qui ont différentes 00:03:16.160 --> 00:03:19.239 affinités pour différentes composantes de la matrice extracellulaire. 00:03:19.239 --> 00:03:24.909 Nous étions particulièrement intéressés par certaines qui sont exprimées dans le 00:03:24.909 --> 00:03:25.909 cerveau. 00:03:25.909 --> 00:03:27.000 Ce schéma montre essentiellement des sous-unités d'intégrines qui contribuent à former ce 00:03:27.000 --> 00:03:28.000 qu'on appelle la barrière hémato-encéphalique. 00:03:28.000 --> 00:03:34.269 Je vais y revenir dans un instant, mais essentiellement, il y a une barrière qui isole les compartiments 00:03:34.269 --> 00:03:36.500 sanguins et vasculaires du cerveau et du parenchyme cérébral. 00:03:36.500 --> 00:03:41.269 C'est étroitement régulé et les virus et d'autres agents infectieux peuvent affecter 00:03:41.269 --> 00:03:42.269 la barrière hémato-encéphalique. 00:03:42.269 --> 00:03:48.819 Il peut donc y avoir une infection dans le cerveau ou un gonflement, une inflammation, 00:03:48.819 --> 00:03:50.680 ce genre de chose. 00:03:50.680 --> 00:03:58.340 Ces intégrines dont je parlais aident à réguler l'étanchéité de cette barrière 00:03:58.340 --> 00:04:01.550 hémato-encéphalique, ce qui sera très important dans un instant. 00:04:01.550 --> 00:04:05.260 Ensuite, nous avons passé beaucoup de temps dans mon laboratoire à examiner des modulateurs 00:04:05.260 --> 00:04:08.150 ou des inhibiteurs spécifiques d'intégrine, et je vais parler un peu de l'un d'entre eux. 00:04:08.150 --> 00:04:10.239 Il s'agit de quelque chose appelé ATN-161. 00:04:10.239 --> 00:04:16.139 Il s'agit d'un peptide qui peut se lier à des intégrines telles que l'alpha 5 bêta 00:04:16.139 --> 00:04:22.480 1, que nous avons depuis identifié comme un récepteur du COVID et nous avons fait 00:04:22.480 --> 00:04:29.550 beaucoup de travail pour examiner si ce peptide inhibiteur pourrait réellement avoir une 00:04:29.550 --> 00:04:33.090 efficacité thérapeutique contre le coronavirus. 00:04:33.090 --> 00:04:40.020 C'est un résumé de quelques années de travail, mais en résumé, vous regardez ici la protéine 00:04:40.020 --> 00:04:41.190 Spike du virus. 00:04:41.190 --> 00:04:43.530 Elle interagit avec des récepteurs connus. 00:04:43.530 --> 00:04:48.580 ACE-2 est l'un que vous avez probablement entendu parler et les intégrines associées. 00:04:48.580 --> 00:04:54.410 Cette interaction facilite la pénétration du virus dans une cellule, puis toutes les 00:04:54.410 --> 00:05:00.580 mauvaises choses qui se produisent à la suite de cette invasion cellulaire. 00:05:00.580 --> 00:05:03.650 Nous avons fait beaucoup de travail pour démontrer essentiellement que si on prend simplement 00:05:03.650 --> 00:05:09.639 la protéine Spike et qu'on la met sur des cellules en culture - dans ce cas, ce sont 00:05:09.639 --> 00:05:11.750 des cellules endothéliales cérébrales, nous avons examiné plusieurs indicateurs 00:05:11.750 --> 00:05:13.550 différents de l'intégrité de la barrière hémato-encéphalique. 00:05:13.550 --> 00:05:16.080 Nous voyons que la protéine Spike à elle seule peut en fait changer les schémas d'expression 00:05:16.080 --> 00:05:17.080 de ces protéines associées à la barrière hémato-encéphalique. 00:05:17.080 --> 00:05:22.229 Elle les réduit, ce qui est un indice (et depuis validé par d'autres) que le virus 00:05:22.229 --> 00:05:24.080 peut réellement affecter les barrières vasculaires. 00:05:24.080 --> 00:05:28.520 Nous avons fait beaucoup de travail au début de la pandémie pour montrer essentiellement 00:05:28.520 --> 00:05:32.590 que ces protéines Spike peuvent se lier aux intégrines et que nous pouvions bloquer cette 00:05:32.590 --> 00:05:35.370 interaction en co-incubant avec ce peptide que j'ai mentionné précédemment, ATN-161. 00:05:35.370 --> 00:05:39.229 C'est une étude qui a été réalisée assez tôt dans la COVID-19. 00:05:39.229 --> 00:05:45.870 Nous avons montré, je pense tout aussi important, que si nous ajoutions des cellules - le virus, 00:05:45.870 --> 00:05:51.139 plutôt, un virus vivant - à des cellules, nous pouvions bloquer une grande partie de 00:05:51.139 --> 00:05:56.350 la réplication virale en ajoutant cet inhibiteur aux intégrines alpha 5 bêta 1. 00:05:56.350 --> 00:05:58.759 C'est montré par le graphique ici. 00:05:58.759 --> 00:06:04.319 Et ici, vous regardez simplement les cellules qui ont été co-incubées avec le virus. 00:06:04.319 --> 00:06:07.560 Toutes ces petites boules rondes ou plaques sont des cellules impactées par le virus. 00:06:07.560 --> 00:06:13.490 Lorsque nous les traitons avec notre peptide ATN, nous pouvons largement supprimer ces 00:06:13.490 --> 00:06:18.930 formations de cellules rondes, ce qui est synonyme de réplication virale. 00:06:18.930 --> 00:06:25.639 Dans des modèles animaux - il existe plusieurs modèles animaux différents pour étudier 00:06:25.639 --> 00:06:31.169 la COVID-19 - mon laboratoire a profité de plusieurs modèles animaux différents au 00:06:31.169 --> 00:06:33.860 fur et à mesure de leur disponibilité. 00:06:33.860 --> 00:06:39.860 Dans un modèle particulier, vous pouvez faire en sorte qu'une souris de laboratoire normale 00:06:39.860 --> 00:06:45.430 exprime la forme humaine d'ACE-2, qui est un récepteur connu pour le virus. 00:06:45.430 --> 00:06:51.000 À l'époque, c'était la seule façon de rendre une souris de laboratoire standard 00:06:51.000 --> 00:06:52.000 susceptible à l'infection. 00:06:52.000 --> 00:06:58.030 Si nous inoculions ces souris avec le coronavirus, puis les traitions avec ATN-161, nous pouvions 00:06:58.030 --> 00:07:00.879 significativement supprimer la charge virale chez les animaux. 00:07:00.879 --> 00:07:11.280 Dans un modèle différent où au lieu de faire exprimer aux souris l'ACE-2 humain avec 00:07:11.280 --> 00:07:17.330 le virus, nous pouvions en fait utiliser une souris transgénique, quelque chose appelé 00:07:17.330 --> 00:07:23.060 K-18, qui exprimait l'ACE-2 humain partout - de manière similaire, si nous infectons 00:07:23.060 --> 00:07:28.050 ces souris, nous pouvons réellement bloquer l'infection en les traitant avec ATN-161. 00:07:28.050 --> 00:07:38.090 Mais un meilleur outil qui a émergé au cours de la dernière année environ est une version 00:07:38.090 --> 00:07:39.730 du coronavirus qui était plus adaptée. 00:07:39.730 --> 00:07:44.570 Il s'agit d'un SARS-CoV-2 qui a été passagé dans des souris de laboratoire standard, introduit 00:07:44.570 --> 00:07:46.400 dans une souris. 00:07:46.400 --> 00:07:53.389 Autorisé à infecter, retiré de la souris, passagé dans un animal différent, etc., 00:07:53.389 --> 00:07:54.389 etc. 00:07:54.389 --> 00:08:00.340 Après dix passages, le virus pouvait réellement infecter des souris de type sauvage. 00:08:00.340 --> 00:08:07.430 Cela facilite vraiment la recherche sur le coronavirus dans les laboratoires, car maintenant 00:08:07.430 --> 00:08:14.009 on peut travailler avec des souris standard auxquelles la plupart des laboratoires ont 00:08:14.009 --> 00:08:15.009 accès. 00:08:15.009 --> 00:08:18.780 Nous avons profité de cela et nous avons réalisé plusieurs études. 00:08:18.780 --> 00:08:25.310 Lorsque nous avons infecté des souris, nous avons simplement attendu deux ou trois jours 00:08:25.310 --> 00:08:30.460 et avons commencé à examiner les marqueurs dans le cerveau. 00:08:30.460 --> 00:08:35.320 Nous avons noté que ces mêmes protéines de jonction serrée - ce sont des protéines 00:08:35.320 --> 00:08:38.279 qui stabilisent, facilitent l'étanchéité de la barrière hémato-encéphalique. 00:08:38.279 --> 00:08:42.750 Ici, vous regardez la claudin-5 est l'une d'entre elles - nous observons une réduction 00:08:42.750 --> 00:08:45.010 significative des niveaux de cette protéine. 00:08:45.010 --> 00:08:49.600 Encore une fois, c'est important pour la stabilité de la barrière hémato-encéphalique. 00:08:49.600 --> 00:08:53.910 Nous observons également une augmentation significative des cellules inflammatoires 00:08:53.910 --> 00:09:01.360 et des astrocytes dans le cerveau lors de l'infection par le coronavirus. 00:09:01.360 --> 00:09:08.209 Maintenant, je devrais souligner que le virus est introduit dans les poumons, donc nous 00:09:08.209 --> 00:09:10.560 regardons dans le cerveau trois jours plus tard. 00:09:10.560 --> 00:09:13.050 Cela se produit en l'absence du virus qui pénètre réellement dans le cerveau. 00:09:13.050 --> 00:09:18.230 Nous observons des changements dans le cerveau qui indiquent une perturbation de la barrière 00:09:18.230 --> 00:09:21.500 hémato-encéphalique et une neuroinflammation trois jours après l'infection. 00:09:21.500 --> 00:09:24.950 C'est juste un autre exemple - nous examinons une coloration des cellules microgliales, 00:09:24.950 --> 00:09:29.180 qui sont les cellules immunitaires résidentes du cerveau. 00:09:29.180 --> 00:09:36.010 Il y a une augmentation significative de l'immuno réactivité des microglies trois jours après 00:09:36.010 --> 00:09:41.190 l'infection par le coronavirus chez les souris de laboratoire standard. 00:09:41.190 --> 00:09:46.120 C'est juste un autre schéma à nouveau où nous avons infecté des souris, des souris 00:09:46.120 --> 00:09:50.210 de laboratoire standard, avec MA10, puis nous avons également traité avec ce ATN-161. 00:09:50.210 --> 00:09:54.490 Très bien, nous avons observé des effets sur divers marqueurs d'inflammation. 00:09:54.490 --> 00:09:58.640 Il s'agit de l'interleukine-6, des cytokines pro-inflammatoires dans le cerveau. 00:09:58.640 --> 00:10:02.670 Nous avons observé qu'ATN-161 pouvait réduire significativement la cytokine pro-inflammatoire 00:10:02.670 --> 00:10:03.880 dans le cerveau. 00:10:03.880 --> 00:10:09.120 Nous avons observé des effets similaires pour bloquer la réduction de la claudine-5, 00:10:09.120 --> 00:10:14.020 que vous obtenez en tant que marqueur de l'intégrité de la barrière hémato-encéphalique. 00:10:14.020 --> 00:10:20.200 Très brièvement, je pense que tout le monde dans cet appel est familier avec le COVID 00:10:20.200 --> 00:10:24.019 long, donc je ne vais pas m'attarder sur cette diapositive. 00:10:24.019 --> 00:10:30.070 Mais disons simplement qu'un des changements qui ont été notés dans le COVID long clinique 00:10:30.070 --> 00:10:34.420 est une réduction du flux sanguin vers le cerveau. 00:10:34.420 --> 00:10:40.720 Il y a plusieurs raisons différentes pour lesquelles cela pourrait se produire, mais 00:10:40.720 --> 00:10:46.550 nous avons décidé de le modéliser chez ces souris de laboratoire standard en plaçant 00:10:46.550 --> 00:10:52.519 des bobines sur les artères carotides - ce sont des vaisseaux sanguins majeurs qui alimentent 00:10:52.519 --> 00:10:58.350 le sang vers le cerveau - et si vous restreignez, mais n'éliminez pas le flux sanguin, généralement 00:10:58.350 --> 00:11:05.540 ce qui se passe chez une souris standard est qu'après quelques semaines, il y a une lésion 00:11:05.540 --> 00:11:09.610 de la substance blanche dans le cerveau. 00:11:09.610 --> 00:11:13.670 Après environ un mois, ces animaux commencent à développer un déficit cognitif. 00:11:13.670 --> 00:11:18.080 C'est une hypoperfusion chronique du sang vers le cerveau entraînant un déclin cognitif. 00:11:18.080 --> 00:11:20.110 Il s'agit d'une démence dite vasculaire. 00:11:20.110 --> 00:11:23.459 Nous avons réalisé plusieurs études et avons essentiellement montré que si vous 00:11:23.459 --> 00:11:27.520 faites cela, attendez environ une semaine après avoir mis ces bobines et infectez ensuite 00:11:27.520 --> 00:11:34.670 les souris, leurs cerveaux sont bien pires que si vous les avez simplement infectées 00:11:34.670 --> 00:11:40.290 seules ou si vous avez simplement mis les bobines par elles-mêmes. 00:11:40.290 --> 00:11:43.730 C'est une intégrine alpha 5 que nous avons identifiée comme un récepteur pour le coronavirus 00:11:43.730 --> 00:11:45.050 - les niveaux dans le cerveau explosent. 00:11:45.050 --> 00:11:48.010 Nous avons observé des changements dans les microglies. 00:11:48.010 --> 00:11:54.829 Nous avons observé des changements assez importants dans la GFAP, le marqueur des astrocytes, 00:11:54.829 --> 00:11:56.780 encore une fois dans le cerveau. 00:11:56.780 --> 00:11:57.780 Je vais avancer rapidement. 00:11:57.780 --> 00:11:59.040 Fondamentalement, si l'on examine les mois qui suivent une infection chez des souris 00:11:59.040 --> 00:12:00.040 de laboratoire, nous constatons des indications claires de neuroinflammation qui sont chroniques. 00:12:00.040 --> 00:12:01.040 Donc, c'est 30 jours après l'infection et nous observons des changements autour des 00:12:01.040 --> 00:12:02.040 vaisseaux sanguins dans le cerveau qui persistent. 00:12:02.040 --> 00:12:03.040 Il s'agit d'une sorte de modèle expérimental de la COVID longue. 00:12:03.040 --> 00:12:04.279 Nous constatons une importante disparition de neurones dans des parties du cerveau où 00:12:04.279 --> 00:12:05.690 vous ne voulez pas que les neurones disparaissent. 00:12:05.690 --> 00:12:09.060 Dans ce cas, l'hippocampe, qui est important pour la consolidation de nouvelles mémoires 00:12:09.060 --> 00:12:10.850 en mémoires à long terme. 00:12:10.850 --> 00:12:15.930 C'est 60 jours après l'infection et chez un certain nombre de souris, nous avons observé 00:12:15.930 --> 00:12:18.800 une importante disparition de cellules neuronales. 00:12:18.800 --> 00:12:24.360 Cela montre simplement des signes d'inflammation, encore une fois, qui étaient chroniques deux 00:12:24.360 --> 00:12:25.639 mois après l'infection. 00:12:25.639 --> 00:12:32.019 Je voudrais vous laisser avec cette idée que nous sommes maintenant à un stade où 00:12:32.019 --> 00:12:36.190 nous pouvons bien modéliser l'infection par le coronavirus chez les souris de laboratoire 00:12:36.190 --> 00:12:37.190 standard. 00:12:37.190 --> 00:12:40.151 Malheureusement, chez un certain nombre de ces animaux, des jours aux semaines aux mois 00:12:40.151 --> 00:12:44.910 après l'infection, nous observons des changements dans le cerveau qui sont aggravés lorsque 00:12:44.910 --> 00:12:50.440 nous superposons, réduisons le flux sanguin, lorsque nous modélisons le déclin cognitif. 00:12:50.440 --> 00:12:54.110 Cependant, nous pensons qu'il existe des récepteurs particuliers qui rendent le coronavirus particulièrement 00:12:54.110 --> 00:12:58.620 virulent que nous pourrions également moduler, dans ce cas, avec ATN-161 que nous étudions 00:12:58.620 --> 00:13:01.410 également comme une thérapie potentielle contre la démence. 00:13:01.410 --> 00:13:10.750 Je pense que, parce que ce récepteur peut jouer un rôle à la fois dans la démence 00:13:10.750 --> 00:13:14.570 et dans l'intégrité vasculaire lors de l'infection par le coronavirus, il pourrait servir à 00:13:14.570 --> 00:13:17.070 la fois à traiter le virus et les [inaudible] vasculaires qui lui sont associés. 00:13:17.070 --> 00:13:19.740 Espérons que je n’ai pas été trop long. 00:13:19.740 --> 00:13:24.680 Je tiens simplement à remercier une équipe qui a contribué à la recherche. 00:13:24.680 --> 00:13:26.020 Et mes collaborateurs. 00:13:26.020 --> 00:13:28.140 Je suppose que nous attendrons la toute fin pour vos questions. 00:13:28.140 --> 00:13:28.860 Merci beaucoup pour votre attention.