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Sí, acabo de presentar esta diapositiva, así que continuaré. Quería comenzar con nuestros agradecimientos. Este proyecto fue un gran esfuerzo en equipo, desde el presidente
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 de la Universidad, incluyendo a profesores, personal y estudiantes. También quería reconocer los muchos departamentos y unidades de la Universidad de Miami, incluyendo el 
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Centro de Investigación sobre el SIDA CFAR, que también forma parte de la Universidad de Miami Weill Cornell Medicine y también MetaSUB. Nuestro plan de análisis de muestra
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s fue diseñado para dividir la muestra en tres partes. Una fue enviada al Centro de Investigación sobre el SIDA, donde fue analizada por el Dr. Mark Sharkey utilizando una 
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ueva tecnología innovadora llamada PCR de Segunda Generación Volcano. Esa fue la base de nuestra respuesta rápida.. Pudimos procesar las muestras en 12 horas. También envia
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mos muestras al Recurso Compartido de Onco-Genómica, donde fueron analizadas mediante RT-qPCR con fines comparativos. Además, en el Recurso Compartido de Onco-Genómica, ana
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lizamos las muestras en busca de variantes utilizando un enfoque de secuenciación dirigida profunda. Las muestras también fueron enviadas a Weill Cornell Medicine, donde fu
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eron analizadas mediante Metatranscriptómica utilizando secuenciación de RNA (RNA-seq).  Y toda la bioinformática se realizó a través de Weill Cornell Medicine. Todos nuest
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os planes de recolección de muestras fueron mapeados a los programas de vigilancia humana en la Universidad de Miami. Tuvimos un programa extenso de pruebas, seguimiento y 
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rastreo de nuestros estudiantes, profesores y personal. También, en el hospital universitario, tuvimos acceso a los registros médicos electrónicos. Además, tuvimos acceso a
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 datos a nivel de código postal a través del Departamento de Salud de Florida. A través de las Escuelas Públicas del Condado de Miami-Dade, obtuvimos información sobre el a
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usentismo. El aspecto más extremo de la pandemia fueron los confinamientos, los cuales fueron motivados por la sobrecarga de los hospitales. Sabemos que a partir de las agu
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s residuales se pueden predecir las hospitalizaciones. Aquí, tenemos una línea negra que corresponde a las hospitalizaciones. La línea verde corresponde a los números de la
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s aguas residuales. Lo que encontramos a lo largo de la pandemia es que, al principio de la pandemia, una pequeña cantidad en las aguas residuales representaba muchas hospi
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talizaciones. A medida que íbamos pasando por las distintas fases de la pandemia, la pendiente se aplanó, de modo que ahora aún estamos viendo la presencia en las aguas res
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iduales, pero no está resultando en tantas hospitalizaciones. En cuanto a la variación, a la derecha vemos los colores que muestran las diferentes variantes tanto en las mu
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stras clínicas como en las muestras de aguas residuales. Ambas seguían un patrón similar. También podemos ver la variación en las aguas residuales. En el lado izquierdo vem
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os el tiempo relativo de la variación observada en las aguas residuales frente a las muestras clínicas. Vemos que, por ejemplo, para la variante Delta, la vimos en las agua
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s residuales una semana o siete días antes de observarla en las muestras clínicas. En cuanto a los datos del hospital, también pudimos evaluar las comorbilidades y observar
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 correlaciones entre los niveles de SARS-CoV-2 en las aguas residuales del hospital y el número de pacientes. Además, al inicio de la pandemia, observamos una correlación c
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n la administración de Remdesivir. También logramos detectar el virus de la viruela del mono en las aguas residuales del hospital y comparar esa presencia con el número de 
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pacientes en el hospital, coincidiendo temporalmente. De manera similar, para Candida auris – un patógeno fúngico – pudimos correlacionar su presencia en las aguas residual
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es con la de pacientes infectados en el hospital. En el caso de Candida auris, no solo detectamos este patógeno a nivel molecular en las aguas residuales, sino que también 
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logramos cultivarlo. Entonces, nuestros próximos pasos realmente se enfocan en objetivos adicionales. Nos hemos asociado con otro grupo de la Universidad de Yale. Hemos des
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argado datos de un análisis de aguas residuales de Biobot; todos estos laboratorios están analizando el SARS-CoV-2. Solo para dar una actualización sobre la situación actua
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l: esto se refiere a la positividad o los casos positivos en el condado de Miami-Dade. Como ven, el número de casos está disminuyendo con el tiempo, lo que podría deberse a
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 que menos personas están yendo a realizarse pruebas. Sin embargo, si dividimos por el número de pruebas realizadas, es decir, el porcentaje de personas que resultan positi
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vas entre las que se hacen la prueba, todavía vemos una positividad significativa que se mantiene bastante constante con el tiempo. Si comparamos esto con los datos de agua
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 residuales de los distintos laboratorios, vemos nuevamente la correlación con la ola Delta, durante la ola Ómicron, entre las aguas residuales y la positividad, y también 
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durante las olas posteriores a Ómicron. Estamos observando consistencia en los resultados de todos los laboratorios Además, con la secuenciación de escopeta (shotgun), como
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 se puede observar en el área verde a la derecha, lo fascinante de esta técnica es que ahora podemos identificar directamente las abundancias de patógenos. En el pasado, tí
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icamente no se podía llegar al nivel del patógeno, pero el área verde muestra los patógenos bacterianos que se están detectando en las aguas residuales mediante secuenciaci
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ón. Además, con la secuenciación de ARN, incluso podemos identificar patógenos virales, incluidos el norovirus y el virus de Aichi. Además de eso, podemos detectar genes de
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 resistencia antimicrobiana. Nosotros descubrimos que estos eran significativamente más abundantes y diversos en las aguas residuales del hospital en comparación con las de
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 la planta de tratamiento de aguas residuales. A medida que avanzamos río abajo a través del sistema de alcantarillado, observamos niveles más bajos y una menor diversidad.
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También nos hemos asociado con un grupo llamado Phase Genomics, que tiene una tecnología muy única que permite atribuir los genes de resistencia a los antimicrobianos (RAM)
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 a su hospedador. Por ejemplo, el hospedador bacteriano de Prevotella tiene dos genes antimicrobianos, que se muestran con las franjas azules aquí. Estos dos genes RAM se e
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ncuentran en la estructura genética de la bacteria. Nuestros próximos pasos se centran en objetivos más allá del SARS-CoV-2, y estamos explorando el muestreo de aire y supe
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rficies, así como de aguas residuales. Estamos muy entusiasmados con la secuenciación y el análisis independiente de objetivos que esta tecnología nos proporciona. El gran 
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esafío es cómo interpretar toda esta información que estamos obteniendo de las aguas residuales: cómo lograr que los datos clínicos coincidan con los datos de las aguas res
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iduales para comprender su significado. Este es uno de los retos al integrar esta información. Además, está el tema de la simulación de datos: intentar combinar automáticam
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ente los datos de las aguas residuales con los datos de salud humana para generar informes de manera más rápida. Y solo me gustaría decir gracias. Mi correo electrónico est
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á aquí por si tienen alguna pregunta. También tenemos nuestras publicaciones mostradas aquí. Gracias.               

